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编号:13168246
无患子皂苷对自发性高血压大鼠AngⅡ/p38MAPK 通路介导的炎症反应与心肌肥厚的影响(2)
http://www.100md.com 2013年4月1日 《中国中药杂志》 2013年第7期
     2.3 ELISA法检测AngⅡ,hs,CRP含量的测定 往预先包被AngⅡ或hs,CRP单克隆抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的AngⅡ或hs,CRP呈正相关。用酶标仪在450 nm 波长下测定吸光度A。

    2.4 免疫组化法检测心肌AT1R,VEGF的蛋白表达 将组织标本固定、脱水透明、包埋切片处理后,再经微波修复抗原染色,以光镜观察并用JEDR801D形态学图像分析系统Version6.0进行图像半定量拍照并分析, 每张切片随机选取不重叠的5个视野, 测定其积分吸光度值( IA ), 取其平均值代表达水平,结果以阳性率和吸光度(A)表示。按阳性染色细胞所占比例分为3级:阳性染色细胞占15%~35%为弱阳性反应(+);阳性染色细胞占36%~75%为阳性反应(++);阳性染色细胞占75%以上为强阳性反应(+++)。

    2.5 Western blot法检测心肌p,p38MAPK的蛋白表达 将组织块称重后 ......
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