半夏毒针晶的致炎效应与巨噬细胞的相关性研究(2)
时,毒关系考察:巨噬细胞和半夏毒针晶的处理方法如上所述。半夏毒针晶用D,Hanks缓冲液溶液配制成混悬液。培养的巨噬细胞分为18组,每组设置3个复孔。其中9组分别给予相同体积的半夏毒针晶混悬液,使终浓度均为50 mg·L-1;对应的9个空白组给予相同体积的D,Hanks缓冲液,摇晃均匀后于37 ℃,5%CO2孵育。分别于孵育后0.5,1,1.5,2,2.5,3,6,9,12 h收集相应时间点组别的细胞上清液,上清液中TNF,α,IL,1β和IL,6的水平按照ELISA试剂盒说明书的方法检测。2.3 半夏毒针晶对巨噬细胞表面形态学的影响 小鼠腹腔巨噬细胞经过纯化,以1×106个/mL接种,爬片于内置无菌盖玻片的6孔细胞培养板内。半夏毒针晶经过紫外照射灭菌,用D,Hanks缓冲液配制成混悬液。培养的巨噬细胞分为4组,每组设置3个复孔。其中2个模型组中加入等体积的半夏毒针晶混悬液,使终浓度均为50 mg·L-1;对应的空白组给予等体积的D,Hanks缓冲液,放置于37 ℃,5%CO2环境中培养 ......
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