孵育试验前将肝微粒体、探针底物、受试药或阳性抑制剂混匀，37 ℃水浴预孵5 min，加入同样预孵5 min的NADPH启动反应，37 ℃孵育30 min后，移至冰上并加入400 μL含内标的甲醇-乙腈(1∶1)终止反应，涡旋，13 800×g，4 ℃离心10 min，取上清进样分析，测定探针产物的生成量，计算相对酶活性和对应的IC50。

    1.3 探针代谢产物的LC-MS/MS定量分析 应用本实验室已建立的LC-MS/MS方法，定量检测孵育体系中的6个探针代谢产物[12]。流动相为含5 mmol·L-1甲酸铵-0.1%甲酸溶液和含0.1%甲酸的乙腈，梯度洗脱。流速为0.35 mL·min-1，进样体积10 μL，运行时间3.5 min。内标为盐酸普萘洛尔(50 μg·L-1)。质谱条件：以ESI源正离子MRM方式检测，毛细管温度300 ℃，毛细管电压 +4 000 V，雾化电压172.375 kPa ......