1.6 流式细胞仪检测线粒体膜电位 收集对数期细胞，用胰酶将细胞制成2×105个/mL悬液，置于6孔培养板内，细胞贴壁后给药。药物作用24 h后，消化，离心收集，用PBS轻轻重悬细胞，加入终浓度为10 μmol·L-1的罗丹明(Rh123)于20～25 ℃避光孵育20 min，用流式细胞仪检测荧光强度，激发波长为488 nm，发射波长535 nm。

    1.7 Western blot检测蛋白表达 加药处理细胞24 h 后，收集细胞并用裂解液裂解细胞获得总蛋白。采用BCA试剂盒于562 nm处测定样品蛋白含量。然后，采用12%的SDSPAGE 分离总蛋白，蛋白质转移到PVDF膜，5%的脱脂奶粉室温封闭2 h。封闭过的膜用TBST洗涤3次。将膜放入杂交袋中，加入一抗4 ℃孵育过夜，使抗原抗体充分结合。隔天，将膜从杂交袋中取出，用TBST洗涤3次；再放入新杂交袋中，加入二抗体以结合一抗，室温孵育膜2 h。化学发光法检测，用凝胶成像系统拍照成像。目的蛋白的灰度值除以内参βactin的灰度值以校正误差，所得结果代表某样品的目的蛋白相对含量。

    1.8 统计学处理 采用SPSSS 18.0统计软件进行数据分析 ......