芹菜素大鼠在体肠吸收动力学的研究(2)
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2.5 恒流泵中硅胶管道对芹菜素吸附情况的研究
配制芹菜素浓度为40 mg·L-1的灌流液3份,用恒流泵将此灌流液以0.25 mL·min-1的速度泵入一干燥硅胶管道内,分别于10,20,30,45,60 min收集流出的灌流液0.25 mL,置1.5 mL离心管中,高速离心(14 000 r·min-1) 5 min,得上清液。取此上清液20 μL进样,测定灌流液中芹菜素浓度。
2.6 单向肠灌流
本实验使用恒流泵将待测溶液匀速泵入大鼠肠道内。为消除实验中硅胶管道对芹菜素的吸附作用,实验前采用供试液将硅胶管道饱和30 min,直至出液口芹菜素浓度与供试液中芹菜素浓度相等。手术前大鼠禁食16 h,自由饮水,按鼠体质量腹腔注射5 mL·kg-1 的30%乌拉坦溶液麻醉并固定。在大鼠腹部正中切开约3 cm,小心分离出十二指肠、空肠、回肠和结肠, 取约10 cm于两端切口插管, 结扎。用预热至37 ℃的生理盐水轻缓地将肠内容物冲洗干净,再用空气将生理盐水排净,然后用KrebsRinger磷酸缓冲液冲洗30 min。实验时取一定浓度的芹菜素溶液(预热至37 ℃)100 mL,先以2.5 mL·min-1的流速灌流10 min,排除肠内气泡,再将流速调为约0.25 mL·min-1,开始计时。灌流30 min后,于30~45,45~60,60~75,75~90,90~105 min时间段,用预先称量的西林瓶收集灌流流出液,并称取西林瓶和灌流流出液的总质量。最后将大鼠处死 ......
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