红景天、蛹虫草、大黄配伍治疗代谢综合征的实验研究Ⅲ——控制血糖作用(2)
2.5 细胞凋亡实验 分别用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测细胞凋亡。大鼠RINm5f胰岛细胞用含10%胎牛血清的RPMI,1640培养液在37 ℃,5%CO2孵育箱内培养。贴壁生长至60%~70%融合时,换含0.25 mmol·L-1软脂酸培养基(模型对照Model组)或含0.25 mmol·L-1软脂酸+不同浓度FF16或阳性对照药Exenatide的培养基,继续培养24~48 h。以AO/EB双染,在激光共聚焦显微镜(Olympus fv 1000) 上观察细胞形态学的变化;或以0.25%胰酶消化并收集细胞1×104个细胞,用FITC,AnnexinV/PI双荧光标记,在流式细胞仪(Becman coulter XL)上检测细胞凋亡的变化。以Cellquest软件分析结果,并计算细胞存活率:细胞存活率=A治疗组/AModel组×100%。2.6 促胰岛细胞分泌实验 大鼠RINm5f胰岛细胞损伤模型及其药物处理的分组同2.5 ......
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