过表达莨菪h6h基因提高颠茄东莨菪碱含量的研究(2)
1.5 颠茄的园艺性状 田间栽培100 d时,颠茄进入果期,测量非转基因植株和转基因植株的株高、顶宽、主茎粗、叶长、叶宽、分支数、鲜重。采用SPSS 19.0软件分析转基因植株与非转基因植株在待测性状上的差异性。表1 转基因颠茄PCR检测所用引物
Table 1 The primers for transgnic Atropa belladonna PCR detection
1.6 颠茄生物碱的提取及检测 颠茄生物碱的提取及检测参照Zhang等[9]的方法。HPLC 采用岛津LC- 6AD泵,CMB-20A控制系统,SPD20-A检测系统。东莨菪碱及莨菪碱对照品购于Sigma公司,Gemini C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)。
1.7 转基因植株实时荧光定量PCR检测基因表达量 RNA的提取方法参见总RNA提取试剂盒使用说明书(天根生化科技有限公司) ......
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