淫羊藿苷对骨髓间充质成骨性活性强于金雀异黄酮(2)
2.4 成骨性诱导 原代骨髓间充质细胞,第1次换液后,分别用含1×10-5 mol·L-1金雀异黄酮、淫羊藿苷(培养组)和对照组(加入药物等体积的DMSO)对细胞进行处理,待细胞70%~80%融合成片时,加入诱导剂(50 mg·L-1磷酸化抗坏血酸、10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠和1×10-8的地塞米松)。ALP活性的测定:成骨性诱导后的第3,6,9,12,15天测定ALP活性,具体方法参见2.2项。
茜素红钙化结节染色:成骨性诱导第12天,弃培养液,PBS漂洗2遍,加入10%福尔马林固定10 min,弃固定液,加入pH 8.9,0.1%的茜素红染色液,37 ℃水浴1 h,流水冲洗,换固定液照相记录结果 ......
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