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编号:13160261
大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究(3)
http://www.100md.com 2013年6月15日 《中国中药杂志》 2013年第12期
大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究,4讨论,5结论,参考文献
     3.4 抗性红花植株的分子生物学鉴定 将植物表达载体p1390::Dp::Doil-aFGF转入红花中,得到了8株抗性植株, 6,7,9号泳道在462 bp位置处扩增出很亮的1条目的带(图7)。取经过上述PCR鉴定过的3株阳性植株的叶片,每株5 g,进行Southern blot杂交,杂交分析结果显示,这3株阳性红花植株独有单一条带的杂交信号,大小不一致,显示aFGF基因已整合到红花基因组中(图8),这3株转基因红花为独立的转化事件。

    3.5 转Doil-aFGF红花植株中外源基因表达情况 以质粒p1390::Dp::Doil-aFGF作阳性对照,野生型红花RT-PCR产物做阴性对照。RT-PCR检测表明,上述Southern杂交检测过的3株转基因红花也在400 bp附近扩增出目的条带,大小与阳性对照一致,而阴性对照、空白对照没有扩增出上述电泳条带。因此说明,aFGF基因在获得的转基因红花中在转录水平上有表达(图9)。

    4 讨论

    4.1 融合表达载体的构建策略 将外源基因与植物特异蛋白基因及其调控序列连接起来 ......
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