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编号:13159014
姜黄素诱导结肠癌LoVo细胞凋亡的作用及机制研究(2)
http://www.100md.com 2013年7月1日 《中国中药杂志》 2013年第13期
     2.2 透射电镜观察细胞超微结构 用0~20 mg·L-1梯度浓度的姜黄素作用LoVo细胞24 h后,用0.25%胰蛋白酶消化离心,以0.01 mol·L-1 PBS(pH 7.3)清洗2遍,1 000 r·min-1离心,收集细胞,迅速加入3%戊二醛固定3 h。用0.01 mol·L-1 PBS(pH 7.3)浸洗3次,加2%琼脂使细胞成团凝固,于1%饿酸中固定2 h。再用0.01 mol·L-1 PBS(pH 7.3)充分浸洗2次,梯度丙酮(50%~100%)逐级脱水,进入氧化丙烯。环氧树脂Epon812逐步浸透、包埋,最后在Epon812中于60 ℃下聚合48 h。超薄切片机切片,醋酸双氧铀和柠檬铅双染后,透射电子显微镜下进行观察。

    2.3 PI单标法检测细胞周期 将0~20 mg·L-1梯度浓度姜黄素处理24 h的LoVo细胞消化离心 ......
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