1.3 灯盏花FSⅡ 3′-RACE和5′-RACE扩增 根据RT-PCR测序结果，设计引物3′-FSⅡ-Outer和3′-FSⅡ-Inner(表1)。按照TaKaRa 3′-Race PCR Kit操作说明，采用巢式PCR进行扩增，扩增体系为：cDNA 1 μL，3′-FSⅡ-Outer 1 μL，3′-Race-Outer 1 μL，dNTPs 1 μL，10×PCR buffer 5 μL，Taq DNA polymerase 1 μL，无菌水40 μL。94 ℃预变性5 min，94 ℃ 30 s，52 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s，20个循环， 72 ℃延伸10 min。取上述产物1 μL做模板，3′-FSⅡ-Inner 1 μL，3′-Race-Inner 1 μL，dNTPs 1 μL，10×PCR buffer 5 μL，Taq DNA polymerase 1 μL和无菌水40 μL。94 ℃预变性5 min，94 ℃ 30 s，50 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s，25个循环，72 ℃延伸10 min ......