HPLC测定冬凌草中迷迭香酸、冬凌草甲素和猫眼草黄素的含量(3)
3.2 检测波长的选择利用PDA检测器在200~400 nm进行紫外吸收全波长扫描,结果迷迭香酸、冬凌草甲素、猫眼草黄素的最大吸收波长分别为329,242,348 nm。在254 nm附近三者均有吸收,但许多杂质在此波长也有吸收,造成干扰。在338 nm附近,杂质干扰较小,但冬凌草甲素无吸收。因此,选择338 nm作为迷迭香酸和猫眼草黄素的检测波长,242 nm作为冬凌草甲素的检测波长。
3.3 流动相的选择
本实验先后试用了甲醇-水,甲醇-0.1%甲酸水溶液,乙腈-水,乙腈-0.1%甲酸水溶液,甲醇-0.03%磷酸水溶液,从分离情况和出峰时间等综合分析,选择甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱。
3.4 提取条件的选择
比较了甲醇、50%甲醇、95%乙醇、70%乙醇、50%乙醇对迷迭香酸、冬凌草甲素和猫眼草黄素的提取效果,结果表明70%乙醇对迷迭香酸和猫眼草黄素的提取率最高。甲醇对冬凌草甲素的提取率最高,但与70%乙醇提取率相差很小,综合考虑,选择70%乙醇为提取溶剂。对提取时间进行考察,比较15 ......
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