Caco—2细胞单层模型研究黄芩提取物中黄芩苷转运机制及白芷提取物对其转运的影响(2)
黄芩提取物,取黄芩50 g,加10倍量水回流提取1 h,再用8倍量水回流提取1 h,合并提取液,放冷,4 000 r·min-1离心20 min,取滤液,浓缩至100 mL,分取2 mL放入到安瓿瓶中,冷冻干燥制成冻干粉,待用(每只冻干粉含生药量约1.0 g,含黄芩苷160.98 mg)。2.4 单向转运实验
从apical(AP,又称黏膜侧或肠腔侧)侧到basolateral(BL,浆膜侧或基底侧)侧的转运:将400 μL药液加到AP侧作为供给药,同时在BL侧加入600 μL空白HBSS作为接收液。
从BL侧到AP侧的转运:将600 μL药液加到BL侧作为供给药,同时在AP侧加入400 μL空白HBSS作为接收液。每组实验平行4份,置转速为54 r·min-1的37 ℃恒温振荡水槽中2 h,2 h后BL(或AP)侧取样品分析。样品用甲醇以1∶1比例稀释样品,涡旋混匀,16 000 r·min-1离心20 min以沉底蛋白 ......
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