2.4 多重PCR鉴定体系建立及优化

    利用白术特异性引物F1，R1和通用引物ITS2F，ITS2R构建多重PCR体系，用于白术，苍术的分子鉴定。优化PCR反应体系，即在特异性PCR反应体系的基础上，分析dNTP，引物，DNA模板， Taq 以及BSA浓度对PCR反应效率的影响，筛选最适PCR鉴别条件。具体设计如下：dNTP浓度2.5，5，10，15，20，30 nmol·L^-1； 引物浓度2.5，5，7.5，10，15，20 pmol·L^-1； DNA模版浓度100，50，20，10， 5，2.5 ng·L^-1； DNA聚合酶0.25，0.5，1，2，2.5，3 U； BSA0，1，1.5，2.5，3.5，5 μg·L^-1；引物总浓度为20 pmol·L^-1，特异性引物与通用引物浓度比9∶1，6∶1，4∶1，3∶1，2∶1，1∶1 ......