2.5实时荧光定量PCR 为了明确AsFPS1基因在不同组织及不同伤害处理下的表达特性，利用荧光定量PCR进行基因水平表达检测，RT-PCR引物为RT-f： ATGATAACTACGGGAAGGATAACGC 和RT-r： CTTCTGCCTCTTGTAGATTTTCCC。仪器采用伯乐的CFX96TM C1000 实时PCR检测系统。反应体系为：2×SYBR Premix Ex TaqTM 5 μL； 正反向引物浓度均为0.25 μL； cDNA 模板0.3 μL； 加水补足至10 μL， 每个反应体系至少重复3 次。实时PCR 扩增程序如下： 95 ℃ 30 s； 95 ℃ 5 s， 60 ℃ 20 s， 40 个循环。实时PCR 反应均以三磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH) 为内参^[17]，GAPDH-f： CTGGTATGGCATTCCGTGTA和GAPDH-r： AACCACATCCTCTTCGGTGTA。

    3结果与分析

    3.1白木香AsFPS1基因的克隆 根据白木香转录组中长为1 342 bp 的cluster58892 序列 ......