2.3复方汉防己和干扰素γ对HSC-T6上清液中TTR，ITIH1，SERPINF2分泌的影响 收集各组上清液，应用R&D分装的ELISA试剂盒，按照说明书设置10个标准品孔，待测样品孔和空白对照孔(每个样品分别设2个复孔)，37 ℃温育30 min，洗涤，加酶标试剂，温育，洗涤，37 ℃避光显色15 min，加终止液，450 nm波长测量各孔的吸光度A，根据标准曲线计算样品浓度。

    2.4细胞免疫荧光检测 将盖玻片放入6孔板内，加入细胞悬液，待细胞融合度达70%左右时，取出玻片，PBS洗2次，4%甲醛固定15 min，PBS洗3次，含0.5%TritionX-100的PBS(PBST)透化细胞膜8 min，5%山羊血清封闭20 min，PBST洗1次，分别加TTR，ITIH1，SERPINF2特异性一抗(1∶200)，湿盒内4 ℃过夜，PBST洗3次，加二抗(1∶50)，室温1 h，PBST洗4次，DAPI染核5 min，激光共聚焦显微镜观察。

    2.5Western blotting 检测细胞中TTR，ITIH1，SERPINF2蛋白的表达 细胞培养48 h后弃去培养液，用预冷的PBS溶液洗涤细胞3次，每孔加入100 μL细胞裂解液，将细胞刮下，冰上裂解30 min ......