2、5 蛋白质质谱分析 按照2、1方法SDS-PAGE凝胶电泳法分离蛋白后，取出条带并采用胰蛋白酶酶解，酶解后用乙腈萃取2次，合并萃取液冷冻干燥后进行MALDI-TOF-TOF- MS检测，得到肽质量指纹图谱。

    3 结果

    3、1 蕲蛇CⅡ提取与纯化 在提取过程中，为防止蛋白变性应控制操作温度不超过4 ℃。在盐析过程NaCl终浓度为1 mol·L^-1时，能产生较多的Ⅱ型胶原蛋白沉淀。离心去除沉淀蛋白后，继续增加NaCl浓度至2～3 mol·L^-1时几乎不产生蛋白沉淀。经过2次不同的离子交换柱分离去除杂蛋白，所提取和纯化的蛋白质最后经低温冷冻真空干燥得白色固体。

    3、2 SDS-PAGE凝胶电泳结果分析 SDS-PAGE电泳检测显示采用DE-52对提取蛋白质进行纯化后，B样品中仍有杂蛋白条带，进一步采用CM650阳离子交换柱进行纯化，最终所得蕲蛇CⅡ(A)和Chondrex公司牛CⅡ(C)均能显示出CⅡ的单体条带和二聚体条带 ......