1.7目的蛋白的酶活检测

    采用Bradford法进行蛋白含量的测定，采用黄嘌呤氧化酶法测定目的蛋白的活力。

    2结果

    2.1人参Cu/Zn-SOD基因的克隆及测序

    人参叶总RNA经电泳检测，条带清晰明亮，无降解，见图1。RT-PCR扩增结果见图2，电泳结果显示，在约464 bp处出现与预期大小一致的单一条带。测序结果与NCBI上公布的高丽参Cu/Zn-SOD对比，其同源性为99%。目的基因与质粒pET-28(a)连接成功后，经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切，电泳结果显示，在约5 225，464 bp处出现预期大小的2条带，说明载体构建成功，见图3。目的基因的基因编码氨基酸序列，经DNAMAN程序进行氨基酸翻译，共有154个氨基酸。经网络程序http：//www.expasy.org/cgi-bin/protparam预测，154个氨基酸相对分子质量为15.46 kDa，加上组氨酸标签翻译的氨基酸相对分子质量0.84 kDa ......