2.4Real-time PCR法检测小鼠颌下腺组织Fas，FasL mRNA的表达 以GAPDH为内参，实验过程按试剂盒说明书进行，具体步骤如下：用Trisol试剂盒提取颌下腺总RNA，取1 μL进行RT-PCR分析。Fas引物序列为上游5′-AGGCCGCCCGCTGTTTTC-3′，下游5′-ACGAACCCGCCTCCTCAGC-3′，产物长度145 bp，Tm值60；FasL引物序列为上游5′-GCCGCCACTGACCCCTCTAA-3′，下游5′-CCACACTCCTCGGCTCTTTT -3′，产物长度242 bp，Tm值60；GAPDH引物序列为上游5′-AAATGGTGAAGGTCGGTGTG-3′，下游5′-TGAAGGGGTCGTTGATGG-3′，产物长度108 bp，Tm值60。PCR反应参数为94 ℃ 5 min，再将反应条件变为94 ℃ 15 s，60 ℃ 45 s，循环扩增40次。60 ℃检测荧光值。

    Fas，FasL及内参GAPDH分别在2个管中同时进行反应，除探针和引物外，2管中加入的RNA模板和其他反应试剂均一致 ......