2.4Caco-2细胞模型

    2.4.1细胞培养 Caco-2 细胞(传代≤40代)接种于培养瓶中，DMEM培养液内含10%胎牛血清、1%非必需氨基酸、1% L-谷氨酰胺、100 U·mL^-1青霉素以及100 mg·L^-1链霉素)，细胞于5% CO2、相对湿度为90%， 37 ℃条件培养。将对数生长的细胞按6×104个/cm2密度接种于Transwell 培养板上，用于细胞转运实验。接种后隔天换液，1周后，每天换液。培养至21 d，以电阻值作指标进行验证，选取细胞跨膜电阻大于500 Ω·cm2。

    2.4.2转运试验 用HBSS溶液配制质量浓度为5， 10， 15 μg·L^-1的咖啡酸溶液，经过虑除菌，用空白HBSS溶液冲洗Transwell板3遍，放培养箱中培养30 min。对于从apical(肠腔侧，AP侧)到basolateral (基底侧，BL侧)转运：将药物溶液0.5 mL 加到AP侧作为供给池，同时BL侧加入1.5 mL空白HBSS溶液作为接收池；对于从BL侧到AP侧转运：将药物溶液1.5 mL 加到AP侧作为供给池 ......