2.5 甲基化分析 按Needs法[13]对HPS1-D进行甲基化反应。经IR分析检测甲基化完全后，用88%甲酸100 ℃水解3 h，然后加2 mol·L^-1的TFA 120 ℃水解3 h，去酸后还原，乙酰化，GC-MS分析。

    气相色谱条件：柱温175 ℃；载气为氦气；进样口温度210 ℃；载气体积流量1.00 mL·min^-1；进样模式为分流；分流比50.0；进样体积1 μL。

    质谱条件：离子源温度200 ℃；接口温度210 ℃；溶剂延迟4 min；阈值1 000；起始时间为4.00 min；结束时间为14.83 min；采集方式为Scan；扫描范围m/z 33.00～630.00。

    2.6 NMR分析 精密称取充分干燥的HPS1-D 15 mg，溶于0.5 mL 重水中，冷冻干燥，如此重复用重水交换3次 ......