北柴胡糖基转移酶基因BcUGT3，BcUGT6的表达分析及其

北柴胡糖基转移酶基因BcUGT3，BcUGT6的表达分析及其原核表达(4)

http://www.100md.com 2014年1月15日《中国中药杂志》 2014年第2期

     图2BcUGT3，BcUGT6，β-AS在MeJA处理北柴胡不定根中的表达

    Fig.2Expression analysis of BcUGT3，BcUGT6，β-AS in MeJA-treated adventitious roots of Bupleurum chinense

    3.4BcUGT3和BcUGT6重组蛋白的原核表达和蛋白纯化

    利用克隆到的植物基因序列进行原核或真核表达，分离纯化表达蛋白，再进行体外酶活分析，是验证未知基因功能的常用手段。本研究采用pET系列载体pET-28a(+)构建BcUGT3和BcUGT6的原核表达载体。以反转录产物为模板，采用高保真DNA聚合酶PCR扩得了目标条带。目标条带首先与T-载体连接，经菌液PCR验证选择阳性克隆后，进行酶切。酶切下来的目标条带再连接pET-28a(+)。菌液PCR验证后 ......

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