玳玳黄酮提取物特征活性成分不同生理状态的药动学特性比较(1)
[摘要]为探索玳玳黄酮提取物临床降血脂药效特性，该文研究比较了玳玳黄酮提取物特征活性成分在正常大鼠及高脂血症模型大鼠体内药动学特性。实验采用UPLC-MS建立血浆中玳玳黄酮提取物特征活性成分柚皮苷和新橙皮苷定量测定法，通过建立高脂血症大鼠模型，比较正常大鼠和高脂血症模型大鼠灌胃玳玳黄酮提取物后血浆中柚皮苷和新橙皮苷的药动学差异。实验结果表明，玳玳黄酮提取物中特征活性成分柚皮苷和新橙皮苷在不同生理状态下的药动学特性存在显著性差异，高脂血症模型大鼠口服玳玳黄酮提取物后柚皮苷和新橙皮苷最大血药浓度Cmax与正常大鼠相比均明显增大，半衰期t1/2和体内滞留时间MRT缩短，但AUC0-24 h变小，达峰时间tmax无差异；进一步证实玳玳黄酮提取物在高脂血症病理状态下能更好的发挥降血脂活性，其中特征活性成分柚皮苷和新橙皮苷是玳玳黄酮提取物发挥生物活性的物质基础。
[关键词]玳玳黄酮提取物；UPLC-MS；高脂血症；药动学
[收稿日期]2013-07-08
, http://www.100md.com
[基金项目]福建省自然科学基金项目(2012J01386)；福建省科技计划项目(2010Y2004)；福建省发展和改革委员会产业技术开发项目(闽发改高技[2011]1598号)
[通信作者]*陈丹，博士，教授，Tel：13515026709，E-mail：gscd2@163.com
[作者简介]曾令军，硕士研究生， Tel：15806026722，E-mail：875276534@qq.com
玳玳Citrus Aurantium L. var daidai Tanaka，属芸香科柑桔亚属植物，为酸橙的一个变种，又名回青橙、代代[1]。课题组前期研究证实，玳玳中含有丰富的黄酮、生物碱等成分[2]，其含量高于同科中其余种属植物[3]，目前已分离获得总黄酮含量稳定大于75%，且具有明显降血脂活性的玳玳黄酮提取物[4-5]，其中特征活性成分为柚皮苷和新橙皮苷。为深入研究玳玳黄酮提取物药效物质的体内药动学规律及特性，及依据临床药效组分多用于高脂血症患者的病理症状，实验比较了玳玳黄酮提取物特征活性成分在正常大鼠及高脂血症模型大鼠不同生理状态下的药动学特性差异。
, 百拇医药
1材料
1.1仪器
Waters ACQUITY UPLC TQD 超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(美国Waters公司)，配四元高压泵，在线脱气机，自动进样器，柱温箱，TQD检测器(三重四级杆，ESI电离源)，Masslynx 4.1工作站控制系统；XS 205 1/10万电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；SK-1快速混匀器(常州国华电器有限公司)；TGL-18G-C高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；Milli-Q纯水器(美国)。
1.2试药
玳玳黄酮提取物(自制，批号 20120806，总黄酮质量分数80.70%，柚皮苷270.17 mg·g-1，新橙皮苷320.32 mg·g-1)；柚皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号 110722-201209)；新橙皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号 111857-201201)；芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，批号 100080-201206)；总胆固醇测定试剂盒(液体)(氧化酶法)(上海科华东菱诊断用品有限公司，20130112K)；甘油三酯测定试剂盒(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130412)；低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(直接法)(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130412)；高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(直接法)(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130112)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为超纯水。
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1.3动物
SD大鼠(200±20) g，SPF级，雄性，由福建中医药大学实验动物中心提供，合格证号SYXK(闽)2009-0001。
1.4大鼠饲料
基础饲料由福建中医药大学实验动物中心提供。高脂饲料为74.2%基础饲料，2%胆固醇，10%猪油，0.8%胆酸钠，5%蛋黄粉，白糖8%，加适量的水充分搅拌混匀，制成条状，放入烘箱，在70 ℃烘干，备用。
2方法与结果
2.1高脂血症模型大鼠的制备
SD大鼠随机分成正常组和高脂血症模型组，饲养条件为每笼5只，温度(23±1) ℃，湿度40%～70%，明暗各12 h，早上9点投食，定期紫外线消毒，每日更换饮水及饲料，保持动物生活环境通风及清洁卫生。自由进食和自由摄水的基础上，正常组喂食基础饲料，高脂血症模型组喂食高脂饲料。共饲养45 d，实验结束前1 d分别从2组中随机取10只大鼠，饥饿过夜，当日称重，用10%水合氯醛3.0 mL·kg-1腹腔麻醉后固定，腹主动脉取全血，室温静置0.5 h后3 000 r·min-1离心10 min，取上层血清，测定血清中TC， TG， LDL-C， HDL-C水平， 见表1。
表1正常及高脂血症模型大鼠血清TC， TG， LDL-C， HDL-C结果(±s，n=10)
Table 1The results of serum TC，TG，LDL-C，HDL-C in normal and hyperlipidemia rats (±s，n=10)
组别TC TG LDL-C HDL-C正常1.43±0.351.26±0.070.14±0.020.77±0.17模型1.97±0.261)2.08±0.511) 0.26±0.081) 0.34±0.061)注：与正常大鼠相比1)P<0.05(表6同)。, 百拇医药(曾令军 陈丹 郑利 连赟芳 蔡韦炜 黄群 林伊莉)
[关键词]玳玳黄酮提取物；UPLC-MS；高脂血症；药动学
[收稿日期]2013-07-08
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[基金项目]福建省自然科学基金项目(2012J01386)；福建省科技计划项目(2010Y2004)；福建省发展和改革委员会产业技术开发项目(闽发改高技[2011]1598号)
[通信作者]*陈丹，博士，教授，Tel：13515026709，E-mail：gscd2@163.com
[作者简介]曾令军，硕士研究生， Tel：15806026722，E-mail：875276534@qq.com
玳玳Citrus Aurantium L. var daidai Tanaka，属芸香科柑桔亚属植物，为酸橙的一个变种，又名回青橙、代代[1]。课题组前期研究证实，玳玳中含有丰富的黄酮、生物碱等成分[2]，其含量高于同科中其余种属植物[3]，目前已分离获得总黄酮含量稳定大于75%，且具有明显降血脂活性的玳玳黄酮提取物[4-5]，其中特征活性成分为柚皮苷和新橙皮苷。为深入研究玳玳黄酮提取物药效物质的体内药动学规律及特性，及依据临床药效组分多用于高脂血症患者的病理症状，实验比较了玳玳黄酮提取物特征活性成分在正常大鼠及高脂血症模型大鼠不同生理状态下的药动学特性差异。
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1材料
1.1仪器
Waters ACQUITY UPLC TQD 超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪(美国Waters公司)，配四元高压泵，在线脱气机，自动进样器，柱温箱，TQD检测器(三重四级杆，ESI电离源)，Masslynx 4.1工作站控制系统；XS 205 1/10万电子天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；SK-1快速混匀器(常州国华电器有限公司)；TGL-18G-C高速台式离心机(上海安亭科学仪器厂)；Milli-Q纯水器(美国)。
1.2试药
玳玳黄酮提取物(自制，批号 20120806，总黄酮质量分数80.70%，柚皮苷270.17 mg·g-1，新橙皮苷320.32 mg·g-1)；柚皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号 110722-201209)；新橙皮苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号 111857-201201)；芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，批号 100080-201206)；总胆固醇测定试剂盒(液体)(氧化酶法)(上海科华东菱诊断用品有限公司，20130112K)；甘油三酯测定试剂盒(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130412)；低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(直接法)(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130412)；高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒(直接法)(KHB上海科华生物工程股份有限公司，20130112)；甲醇、乙腈为色谱纯；水为超纯水。
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1.3动物
SD大鼠(200±20) g，SPF级，雄性，由福建中医药大学实验动物中心提供，合格证号SYXK(闽)2009-0001。
1.4大鼠饲料
基础饲料由福建中医药大学实验动物中心提供。高脂饲料为74.2%基础饲料，2%胆固醇，10%猪油，0.8%胆酸钠，5%蛋黄粉，白糖8%，加适量的水充分搅拌混匀，制成条状，放入烘箱，在70 ℃烘干，备用。
2方法与结果
2.1高脂血症模型大鼠的制备
SD大鼠随机分成正常组和高脂血症模型组，饲养条件为每笼5只，温度(23±1) ℃，湿度40%～70%，明暗各12 h，早上9点投食，定期紫外线消毒，每日更换饮水及饲料，保持动物生活环境通风及清洁卫生。自由进食和自由摄水的基础上，正常组喂食基础饲料，高脂血症模型组喂食高脂饲料。共饲养45 d，实验结束前1 d分别从2组中随机取10只大鼠，饥饿过夜，当日称重，用10%水合氯醛3.0 mL·kg-1腹腔麻醉后固定，腹主动脉取全血，室温静置0.5 h后3 000 r·min-1离心10 min，取上层血清，测定血清中TC， TG， LDL-C， HDL-C水平， 见表1。
表1正常及高脂血症模型大鼠血清TC， TG， LDL-C， HDL-C结果(±s，n=10)
Table 1The results of serum TC，TG，LDL-C，HDL-C in normal and hyperlipidemia rats (±s，n=10)
组别TC TG LDL-C HDL-C正常1.43±0.351.26±0.070.14±0.020.77±0.17模型1.97±0.261)2.08±0.511) 0.26±0.081) 0.34±0.061)注：与正常大鼠相比1)P<0.05(表6同)。, 百拇医药(曾令军 陈丹 郑利 连赟芳 蔡韦炜 黄群 林伊莉)