双相体系中固定化酶水解黄芩苷制备黄芩素的研究(3)
综上所述,确定游离β-葡萄糖苷酶水解黄芩苷最适反应条件为:温度50 ℃,pH 5.0,反应时间10 h;固定化β-葡萄糖苷酶双相水解黄芩苷最适反应条件为:温度50 ℃,pH 4.5,反应时间10 h。此外,由表2可以看出,在相同反应时间内,固定化酶双相反应的产率均比游离酶单相反应的产率高,说明前者的反应速率较快,可能由于双相反应在反应的同时将产物黄芩素萃取到有机相中,水相中产物的量减少,更利于反应的进行。且固定化酶双相反应的最终产率比游离酶单相反应有明显提高。根据上述实验结果,以最适反应条件分别用游离酶和固定化酶在单相和双相体系中水解黄芩苷,重复试验3次,结果见表3。从实验结果可以看出,该方法具有良好的稳定性,适应于生产。
3.3 黄芩苷和黄芩素样品的检测
3.3.1 TLC检测 用TLC检测游离酶和固定化酶水解黄芩苷10 h后的反应液,游离酶和固定化酶水解黄芩苷的反应液中均只有黄芩素而无黄芩苷 ......
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