催眠睡茄Withania somnifera 毛状根的诱导及睡茄素A的合成(2)
2.4 催眠睡茄毛状根的rolB基因的分子检测分别取不同无性系的毛状根用CTAB[16]法提取毛状根的DNA,采用PCR扩增的方法检测毛状根中virD基因和rolB基因,扩增体系使用Promega公司的GoTaq?Green Master Mix. 参照张显强等[15]的检测方法。
2.5 催眠睡茄植株及毛状根中睡茄素A的HPLC检测
2.5.1 色谱条件 Symmetry-C18色谱柱;流动相A为三重蒸馏水,流动相B为试剂乙醇(乙醇-甲醇-异丙醇 90.6∶4.5∶5.9)与甲醇1∶1混合;流动相进样体积比为1∶1;检测波长 230 nm;柱温 38 ℃;流速 1 mL·min-1;进样体积为20 μL。
2.5.2 睡茄素A标准曲线的绘制 精密称取睡茄素A对照品,分别配置成质量浓度为200,150,100,50,25 mg·L-1的对照品贮备液 ......
您现在查看是摘要页,全文长 3888 字符。