芍药苷对胶原诱导型关节炎大鼠外周血单个核细胞糖皮质激素受体的影响(2)
1.6 ELISA法检测PBMCs中GCRα，GCRβ的表达 将分离的PBMCs在-20 ℃反复冻融3次，使细胞溶解破裂，然后1 500×g离心10 min，收集上清按ELISA检测试剂盒说明书检测GCRα，GCRβ的表达。1.7 逆转录PCR法检测GCRα，GCRβ mRNA 将分离的PBMCs混匀，按RNA提取试剂盒说明书提取总RNA，并用紫外分光光度计检测纯度，A260/A280在1.7～1.9，经琼脂糖电泳分析28S，18S 2条带清晰可见，显示总RNA片段未降解。取总RNA 1 μg，加入RI/RT Enzyme Mix 1 μL，2×TS Reaction Mix 10 μL，oligo dT 1 μL，加RNase-freeH2O至终体积20 μL建立逆转录(RT)体系 ......
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