1.9 Angptl4与PI3K基因的检测 术后18 d，动物灌注后于肌腹中部切取肌组织，立即放入Trizol中提取总RNA，组织匀浆后转入Eppendorf管，室温放置5 min；加入0.2 mL氯仿剧烈震摇15 s后，室温放置3 min。12 000 r·min^-1， 4 ℃离心15 min。取上清液，加等体积异丙醇室温放置10 min。12 000 r·min^-1，4 ℃离心10 min。沉淀用75%乙醇洗涤1次，干燥5 min，加适量DEPC处理过的无菌水溶解RNA。紫外分光光度计测定RNA在波长260，280 nm的吸光度，进行定量和纯度检测并用电泳法鉴定其分子完整性。

    在GenBank中查找大鼠Angptl4基因序列，按照引物设计原则进行设计。引物序列如下：Angptl4正义引物5′-AGAAGTTGGAGATGCAGAGGGAC-3′，反义引物5′-CCACAAGAGCACCATTGAGTGTAT-3′；PI3K正义引物5′- CCGACCGCTAAGGTTCCAGG-3′，反义引物5′-GGTGTGAACATGACCGAGGCT-3′；β-actin正义引物5′-GGGAAATCGTGCGTGACATT-3′ ......