针对诱导温度、诱导时间、IPTG浓度及诱导时宿主菌的A600 4个因素，保持其中的3个因素不变，分别单独考察单一因素对丹参WRKY1重组蛋白表达的影响。

    2.4菌液生物量的测定

    取适量的宿主菌菌液，以含有Kan的LB液体为空白对照，检测其在A600处的吸光度，作为其生物量的标志。

    2.5包涵体蛋白的提取

    包涵体蛋白的提取，涉及到的试验方法均参考文献[8]。

    2.6重组蛋白SmWRKY1的纯化

    根据上述优化条件，提取包涵体蛋白，提取液经0.45 μm的滤膜过滤后，采用Ni2+亲和色谱法，用Ni2+ SepharoseTM 6 Fast Flow过柱纯化滤液，然后采用30 kDa的浓缩柱浓缩纯化后的样品，最后进行SDS-PAGE凝胶电泳检测，并在595 nm处，检测其浓度。

    2.7重组SmWRKY1蛋白的蛋白印迹

    纯化蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳分离后，通过电转化到PVDF膜上，转化完全的膜，用100%的甲醇漂洗2次 ......