[摘要] WRKY转录因子是一类含有高度保守的WRKY结构域的锌指蛋白，是植物所特有的转录因子家族。该研究将已克隆的SmWRKY1 cDNA构建到原核表达载体pET28a上，转化大肠杆菌BL21 (DE3) 进行诱导表达，SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约36 kDa，与预测的蛋白相对分子质量一样，说明该基因在大肠杆菌中成功表达。对影响蛋白表达的4个因素：诱导时间、诱导温度、IPTG浓度及诱导前菌液的浓度进行优化，结果表明在大肠杆菌BL21 (DE3) 中，当A600达到约1.0～1.5时，加入0.2 mol·L^-1的IPTG，在20 ℃诱导培养12 h后SmWRKY1蛋白的表达量较高。原核表达产物SmWRKY1蛋白以包涵体的形式存在，采用尿素提取包涵体蛋白，用Ni2+亲和色谱法纯化表达蛋白，纯化后蛋白的质量浓度为2.454 g·L^-1。经蛋白质印迹检测，His-Tag单克隆抗体可以特异性的识别SmWRKY1蛋白 ......