汉黄芩素抑制乳腺癌细胞增殖及侵袭的实验研究(2)
1.4 细胞黏附实验 分别将FN,LM各2.0 μg铺于96孔板,室温干燥后,用含1%的BSA培养液1640封闭过夜,PBS洗3次,以含0.1% BSA的无血清1640培养液悬浮MDA-MB-231细胞,每孔加入8×103个细胞,加药组同时加入以含0.1%BSA的无血清1640培养液配制的汉黄芩素至终浓度10,20,30 μmol·L-1,37 ℃,5% CO2细胞培养箱中孵育4 h,PBS轻轻吹打,洗去未黏附的细胞,弃去残余PBS,每孔加入100 μL无血清1640培养液溶解MTT(50 mg/孔),于细胞培养箱中继续培养4 h,弃上清,加入150 μL DMSO,室温震荡10 min,充分混匀,酶标仪测定570 nm处吸光度。细胞黏附率以黏附细胞与总细胞570 nm的比值来表示。1.5 细胞迁移实验 将MDA-MB-231细胞按6×104个/孔的密度接种到24孔培养板中,培养24 h,待细胞长成均匀单层后 ......
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