传统的RNAi载体构建方法步骤繁多，实验周期长，Gateway技术与传统的方法相比，不用依赖限制性内切酶，而是依靠载体上存在的特定重组位点和重组酶，Gateway的干扰载体pK7GWIWG2D载体含有2个aatR1和aatR2重组位点，可以将目的基因特异性片段反方向插入到内含子序列的两侧，利用位点特异性重组将目的基因一次整合到载体上，不需要中间载体。重组过程仅需要2步反应，BP与LR反应，即可高效、快速地将目的基因克隆到其目的载体(destination vector)pK7GWIWG2D上。通过使用Gateway方法成功构建丹参SmNAC1转录因子的RNAi植物表达载体，此方法在时间上要比传统方法快2～3倍，成功率也高达90%以上，例如，BP反应，成功效率十分高，反应后转入大肠杆菌中，只需一夜，就可以培养基上长出铺满平板的单克隆斑点 ......