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编号:13128702
人参内生细菌NJ13在宿主体内定殖特性及对人参黑斑病的防治效果(2)
http://www.100md.com 2014年5月15日 《中国中药杂志》 2014年第10期
     2.3 NJ13抗生素标记菌株的筛选及生物学特性 参考文才艺等[8]方法加以改动,逐步提高培养基中抗生素浓度对生防菌株NJ13进行抗性诱导,获得同时抗利福平和链霉素2种抗生素的双抗菌株。在NA培养基冷却至约50 ℃时加入配制好的利福平溶液,制成含利福平40 mg·L-1的平板培养基,将NJ13原始菌株涂布于抗生素平板上,28 ℃培养2~4 d,观察到有菌落长出后,选取生长旺盛的单菌落,转接到含利福平80 mg·L-1的平板上,依次挑选菌体生长情况良好和菌落形态和原始菌落形态相同的抗性突变株,按照同样的方法逐步提高抗生素含量,获得利福平标记菌株NJ13-rif。在此基础上,用同样的方法诱导利福平标记菌株产生对硫酸链霉素的抗性,起始抗生素质量浓度为50 mg·L-1,逐步提高硫酸链霉素浓度,最终获得双抗菌株NJ13-rif-stre,用NJ13-R表示。

    将NJ13-R在NA斜面培养基上培养2 d为1代 ......
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