定量指纹图谱在醒脑通络注射液氨基酸成分分析中的应用(3)
样品测定：分别取10批不同批次的醒脑通络注射液，依法分别测定，计算12种氨基酸的含量测定数据，结果见表4。
3 讨论
醒脑通络注射液处方中水牛角经酸水解，故测定氨基酸时无需对样品进行水解处理。氨基酸为末端吸收，因此要衍生化完全才能准确检测。本法中氨基酸衍生试剂在紫外图谱中可产生吸收，因此，通过对比观察剩余氨基酸衍生试剂的量，可以较为方便的得知氨基酸衍生化的程度。
本方法衍生过程中加热的目的是将衍生酪氨酸时的副产物转化为单一的主产物。在室温下此转化反应较缓慢，其半衰期约1 h，衍生空白溶液时无需加热。
醒脑通络注射液定量指纹图谱方法学考察结果表明，该方法精密度、重复性、回收率结果均较好，能够准确、快速的测定醒脑通络注射液氨基酸指纹图谱及12中氨基酸的具体含量。且该方法重复性良好，10批醒脑通络注射液的指纹图谱相似度均在0.95以上，12种氨基酸的含量均一、稳定。该方法从定性及定量2个层面反应醒脑通络注射液中氨基酸的存在情况，提高了醒脑通络注射液氨基酸质量评价水平。
[参考文献]
[1] 孙兰，李家春，李芳，等. 惊天宁注射液在大鼠体内药代动力学研究[J]. 中药药理与临床， 2011，27 (4) ：80.
[2] 中国药典.一部[S]. 2010.
[3] 高向阳，刘娜. AccQ·Tag柱前衍生反相-高效液相色谱法测定齿果酸模中的氨基酸含量[J]. 食品科学，2011，32(20)：160.
[4] 师涛，吕琳昂，覃峰，等. 定量指纹图谱在安神补脑液质量评价中的应用[J].中国药学杂志， 2009，44 (5) ：386.
[5] 郑灏，程显隆，魏锋，等. 雷丸中 16 种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定[J].药物分析杂志， 2011，31 (9) ：1631.
[6] 毕宇安，王振中，宋爱华，等. 热毒宁注射液高效液相色谱指纹图谱研究及多成分定量分析[J] . 世界科学技术， 2010，12 (2) ：298.
[7] 邹秦文，肖新月，程显龙，等. 百令胶囊中17种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定[J] . 药物分析杂志， 2010，30 (9) ：1630.
[8] 杨菁，孙黎光，白秀珍， 等. 异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱法同时测定 18 种氨基酸[J]. 色谱， 2002， 20(4)： 369.
[9] 董玉秀， 张村，熊国良. 水牛角四种不同提取方法的实验研究 [J]. 河南中医药学刊， 1996， 11(1)： 27.
[10] 朱智. 甲邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定水牛角中氨基酸的含量[J]. 分析化学研究简报，2000， 28(5)： 609., http://www.100md.com(胡军华 林夏 仲艳 李慧 吴健雄 李家春 王振中 萧伟)
3 讨论
醒脑通络注射液处方中水牛角经酸水解，故测定氨基酸时无需对样品进行水解处理。氨基酸为末端吸收，因此要衍生化完全才能准确检测。本法中氨基酸衍生试剂在紫外图谱中可产生吸收，因此，通过对比观察剩余氨基酸衍生试剂的量，可以较为方便的得知氨基酸衍生化的程度。
本方法衍生过程中加热的目的是将衍生酪氨酸时的副产物转化为单一的主产物。在室温下此转化反应较缓慢，其半衰期约1 h，衍生空白溶液时无需加热。
醒脑通络注射液定量指纹图谱方法学考察结果表明，该方法精密度、重复性、回收率结果均较好，能够准确、快速的测定醒脑通络注射液氨基酸指纹图谱及12中氨基酸的具体含量。且该方法重复性良好，10批醒脑通络注射液的指纹图谱相似度均在0.95以上，12种氨基酸的含量均一、稳定。该方法从定性及定量2个层面反应醒脑通络注射液中氨基酸的存在情况，提高了醒脑通络注射液氨基酸质量评价水平。
[参考文献]
[1] 孙兰，李家春，李芳，等. 惊天宁注射液在大鼠体内药代动力学研究[J]. 中药药理与临床， 2011，27 (4) ：80.
[2] 中国药典.一部[S]. 2010.
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[4] 师涛，吕琳昂，覃峰，等. 定量指纹图谱在安神补脑液质量评价中的应用[J].中国药学杂志， 2009，44 (5) ：386.
[5] 郑灏，程显隆，魏锋，等. 雷丸中 16 种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定[J].药物分析杂志， 2011，31 (9) ：1631.
[6] 毕宇安，王振中，宋爱华，等. 热毒宁注射液高效液相色谱指纹图谱研究及多成分定量分析[J] . 世界科学技术， 2010，12 (2) ：298.
[7] 邹秦文，肖新月，程显龙，等. 百令胶囊中17种氨基酸的柱前衍生化RP-HPLC法含量测定[J] . 药物分析杂志， 2010，30 (9) ：1630.
[8] 杨菁，孙黎光，白秀珍， 等. 异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱法同时测定 18 种氨基酸[J]. 色谱， 2002， 20(4)： 369.
[9] 董玉秀， 张村，熊国良. 水牛角四种不同提取方法的实验研究 [J]. 河南中医药学刊， 1996， 11(1)： 27.
[10] 朱智. 甲邻苯二甲醛柱前衍生反相高效液相色谱法测定水牛角中氨基酸的含量[J]. 分析化学研究简报，2000， 28(5)： 609., http://www.100md.com(胡军华 林夏 仲艳 李慧 吴健雄 李家春 王振中 萧伟)