2.4 裸鼠脾、胃、肺中PI3K，AKT蛋白表达的检测 将固定后的样本取出，经常规脱水，透明、浸蜡，包埋后，将每个样本蜡块连续切片3张，每张厚约4～5 μm。切片常规脱蜡至水，PBS清洗5 min×3次，高压热修复，内源性过氧化物酶阻断，PBS清洗5 min×3次，加一抗37 ℃孵育1 h，PBS清洗5 min×3次，加二抗37 ℃孵育45 min，PBS清洗5 min×3次，DAB显色，透明后封片。以PBS代替一抗作为阴性对照组。免疫组化结果采用Image Pro Plus医学图像分析系统进行图像分析，在400倍高倍镜下，随机取5个视野，每个视野为2 592×1 944像素点，分别测出阳性反应细胞的总面积(Area) 和积分吸光度(IA)，求出平均吸光度。

    2.5 实时定量PCR方法(Real-time PCR)检测裸鼠脾、胃、肺中PI3K，AKT mRNA的表达 在PCR反应体系中加入荧光染料，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后对未知模板进行相对定量分析。利用Primer Premier 5.0软件设计PCR引物 ......