苦碟子注射液对缺血性脑卒中火毒证大鼠作用的差异蛋白质研究(3)
3.4 2-DE结果经2-DE及考马斯亮蓝染色后,得到2组脑组织的2-DE图谱,并在相同条件下均将同一蛋白样品重复实验3次。应用PD Quest软件检测蛋白点,假手术组检测到蛋白点502个,模型组515个,蛋白点主要位于相对分子质量25~100 kDa,等电点4~7处,2组之间凝胶的匹配率为70.2%~74.5%。2组蛋白点表达水平相差2倍以上的有87个。手工标记出45个差异明显的的蛋白点,见图3。
3.5 上样量改进和差异蛋白点分析
上样量的控制也是2-DE 图谱最终效果的影响因素之一,为获得最佳的上样量,对药物组分别采用800,1 000,1 200 μg 3个上样梯度进行电泳,发现对
图3 大鼠脑组织的2-DE图谱
Fig.3 The two-dimensional gel electrophoresis profiles of sham group and model group of rat brain tissue proteins
于24 cm非线性pH 3~10的IPG胶条,大鼠脑蛋白上样量为1 000 μg较适合 ......
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