1.4 免疫荧光测PCNA 6孔板中放入盖玻片，细胞消化后均匀铺于6孔板的盖玻片上，细胞生长密度适宜后给药，细胞给药时间结束后，PBS冲洗细胞，4%多聚甲醛固定15 min后弃掉，再用PBS冲洗3次，每次5 min。加入0.5% Triton透化穿孔10 min，PBS洗3次，每次5 min。加入3%BSA，37 ℃下封闭30 min。PBS洗后6孔板中每孔加入PCNA一抗4 ℃孵育过夜。第2天回收一抗，PBS洗5 min，一共3次，6孔板中每孔加入100 μL Cy3荧光二抗，避光37 ℃下孵育2 h。时间结束后PBS洗3次，每次5 min。每孔加入100 μL DAPI孵育15 min。PBS洗3次，每次5 min。抗淬灭剂封片，置于荧光显微镜下观察。

    1.5 免疫蛋白印迹分析 各组加药培养24 h后收集细胞，预冷的磷酸盐缓冲溶液反复冲洗细胞3遍，加入细胞裂解液 ......