2.5.1 方法专属性试验 取空白血浆分别为空白血浆、加入50 μL的芦丁储备液的空白血浆、加入50 μL的芦丁储备液及30 μL黄芩苷储备液的空白血浆；取大鼠灌胃黄芩苷单体后8 h血浆样品加入30 μL的芦丁储备液；按2.4项下样品处理方法操作，按2.1项下色谱条件测定，考察血浆中其他成分及内标对黄芩苷的干扰，见图1，可知血浆样品中黄芩苷与空白血浆中加入的黄芩苷保留时间一致，空白血浆及样品血浆中杂峰对黄芩苷无干扰，黄芩苷与内标芦丁分离良好。

    2.5.2 黄芩苷标准曲线 精密取黄芩苷储备液1，5，10，20，30，50，80 mL于100 mL量瓶中，用甲醇定容。精密吸取空白血浆200 μL于离心管中，平行吸

    A.空白血浆；B.空白血浆加内标；C.空白血浆加内标及黄芩苷；D.血浆样品加内标。

    图1 大鼠血浆中的黄芩苷HPLC图

    Fig.1 HPLC Chromatograms of baicalin in rat plasma

    取6份，分别加入不同浓度的黄芩苷储备液0.2 mL，按2.4项下样品处理方法操作，按2.1项下色谱条件测定。每一浓度做5份平行样品。以黄芩苷峰面积与内标峰面积比的平均值(Y)为纵坐标，黄芩苷浓度(X，mg·L^-1)为横坐标进行线性回归，得标准曲线方程。结果表明血浆中药物质量浓度在0.32～25.6 mg·L^-1，黄芩苷峰面积与内标峰面积之间均呈良好的线性关系，标准曲线方程为Y=0.131X+0.031 6(r=0.999 8)；RSD<10% ......