水飞蓟发状根培养体系的建立及其水飞蓟宾含量的测定(3)
2.5 培养基pH对发状根诱导率的影响在水飞蓟发状根的诱导过程中,在共培养时培养基pH的不同对水飞蓟发状根诱导率也有很大的影响。培养基pH在6.0~6.5对水飞蓟诱导效果最好,诱导率为79.81%~84.36%。pH 4.0~6.0时,随着pH的增大而诱导率增加,高于6.5,随着pH的增大诱导率降低,见图5。
2.6 水飞蓟发状根的PCR分子检测
R15834,R1601,R1000,A4,1025,R1 6种发根农杆菌所诱导的水飞蓟发状根中,A4菌株较另外5种菌株,不仅诱导率高,而且生长迅速、根系发达、分支较多。挑选根系发达、分支较多、生长迅速的发状根,转入MS液体培养基中进行悬浮培养,得到水飞蓟发状根株系,保存备用,对其进行PCR分子检测,拍照(125 V电压,20 min),得到谱图,见图6。从PCR检测结果看出在根段转化根条带出现了与基因引物相同的条带,自然状态生长的根则没有出现与基因引物相同的条带,证明A4菌株中质粒DNA片段已整合进转化根的基因组中 ......
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