津血源增加口干症模型鼠唾液分泌机制的实验研究(2)
2.2 Western Blot检测AQP5 毛果芸香碱(1 mg·kg-1)尾静脉给药,作为AQP5水平表达的阳性对照组。津血源灌胃30 min后,脱颈处死大鼠,切开双侧颈部,取双侧下颌下腺腺体组织。样品通过RIPA裂解获得上清,每个样品分别上样80 μg。上样完毕后,聚丙烯酰胺凝胶先90 V跑完积层胶,再将电压升至200 V直到电泳结束。电泳结束后,取下凝胶进行转膜,恒压100 V转膜,约为1.5 h。电转结束后,取下膜后先用PBS洗涤4次,每次5 min。然后置于5%脱脂奶粉封闭液中封闭 37 ℃ 1 h。用封闭液稀释一抗,膜在一抗稀释液中37 ℃反应1 h。洗膜4次,每次5 min;用含5%牛奶的封闭液稀释二抗。膜在二抗中37 ℃反应1 h。最后,洗膜ECL显影。2.3 统计方法 结果用±s来表达。采用GraphPad software软件,进行统计数据及检验。统计方法用单因素方差分析或者非参秩和检验,P<0.05为2组之间存在统计学差异。
3 结果
3.1 津血源诱导模型鼠唾液分泌的观察 给药阿托品(1 mg·kg-1)建立模型鼠后 ......
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