蛋白质组学方法研究唐草片对微粒体CYP450酶的影响(1)
[摘要] 艾滋病(AIDS)患者常用唐草片进行辅助甚至替代治疗,然而中药成分复杂,其对抗病毒药物的影响及其作用机制尚不清楚。CYP450酶是药物的主要代谢酶,因此,研究中药唐草片与依非韦伦联合用药前后对CYP450酶的调控具有重要意义。蛋白质组学以其高通量高灵敏度的特点被广泛用于代谢酶的研究。 该文采用差速离心法分离肝微粒体,SDS-PAGE分离其蛋白质,切取CYP450所在的3条电泳带,用液相色谱串联质谱进行鉴定,一共鉴定了16个CYP450同工酶。为了定量分析唐草片对CYP450酶的影响,采用基于质谱的多反应监测技术(MRM)。根据蛋白质的质谱鉴定结果,选择CYP2C11。其特征多肽通过Expasy blast搜索获得。片断离子的m/z<800。该文CYP2C11的离子对的m/z为711.5/232.1,711.5/319.2,711.5/466.2 和711.5/595.3;内标 (IS)ESAT-6肽的m/z为735.5/215.3 ......
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