由于紫河车药材混伪品的基原动物猪、牛、羊与人的亲缘关系相差甚远，所以在此不对其进行种间变异分析。

    3.3 紫河车药材及其混伪品NJ系统聚类树鉴别 基于COI序列构建紫河车及其混伪品的NJ树见图1，紫河车药材基原样品单独聚为一支，有明显的单系性。混伪品家猪、黄牛、水牛、绵羊、山羊的COI序列也分别单独聚为一支，支持率都达到了100%。因此，基于COI序列构建的NJ树能够明显区分紫河车药材与其混伪品。

    4 讨论

    4.1 紫河车药材DNA提取注意事项与质量分析 紫河车药材经过一定的炮制加工，在取样时需注意取样部位，观察药材整体，从药材内部取样，避开药材炮制表面，防止被其他污染物干扰实验结果。本研究的DNA提取是按照试剂盒操作说明进行实验，但通过多次反复实验对比发现，对试剂盒操作步骤上进行部分优化更容易获得高质量DNA。具体优化操作如下：①对试剂使用量可酌情加倍，效果更好；②水浴时间可适当延长，使DNA充分溶出，提高样品消化程度，实验表明56 ℃水浴2 h效果较好。

    对市售紫河车药材进行DNA提取和PCR扩增时 ......