[摘要]建立稳定、可靠的金钱草ISSR-PCR反应体系，为金钱草遗传多样性分析、优良品种选育、药材分子鉴定奠定基础。该研究在7水平单因素实验的基础上，采用L16(45)正交试验设计，应用SPSS 19.0进行方差分析，对影响反应体系的5个主要因素在4个水平上进行优化。利用优化的反应体系，筛选引物最适退火温度，以23份不同产地金钱草材料检测体系稳定性。结果显示模板DNA，引物，dNTP，Mg2+，Taq酶5个因素对金钱草ISSR-PCR反应结果均有极显著影响，影响大小依次为引物>Taq酶>模板DNA>Mg2+>dNTP，确定最优反应体系为总体积25 μL，模板DNA 60 ng，引物0.3 μmol·L-1，dNTP 0.2 mmol·L-1，Mg2+ 1.8 mmol·L-1，Taq酶1.25 U。经不同产地样品检测，该优化体系稳定、可靠。该研究为其他物种ISSR-PCR体系的优化提供参考。

    [关键词]金钱草；正交设计；ISSR-PCR；体系优化

    中药金钱草为报春花科植物过路黄Lysimachia christinae Hance.的干燥全草^[1] ......