狭苞橐吾中一个新的艾里莫芬烷型倍半萜(1)
[摘要]利用各种色谱分离技术，从狭苞橐吾Ligularia intermedia地上部分75%乙醇提取物中分离得到4个化合物，通过理化数据和波谱数据鉴定化合物的结构分别为(3aR，4R，5S，7S，7aS)-2-acetyl-7，7a-dihydroxy-3a，4-dimethyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-3H-inden-5-yl acetate(1)，10β-羟基-艾里莫芬-7(11)-烯-12，8α-内酯(2)，β-谷甾醇(3)和β-胡萝卜苷(4)。其中化合物1为新的降二碳艾里莫芬烷型倍半萜。
[关键词]橐吾属；狭苞橐吾；艾里莫芬烷型倍半萜；甾醇
狭苞橐吾Ligularia intermedia Nakai 为菊科橐吾属植物，产于云南西北和东北部、四川、贵州、湖北、湖南、河南、甘肃、陕西、华北及东北等地[1]。民间用于润肺化痰、止咳平喘[2]。橐吾属植物含有三萜类、倍半萜类、单萜类、苯并呋喃类、黄酮类、生物碱类等化学成分，在抗肿瘤、消炎、镇咳等方面发挥着重要作用[3]。为深入研究和开发天然药物资源，本实验对狭苞橐吾进行了化学成分研究。从狭苞橐吾的地上部分中分离得到4个化合物，利用核磁共振等现代波谱数据并结合文献对比，将化合物确定为(3aR，4R，5S，7S，7aS)-2-acetyl-7，7a-dihydroxy-3a，4-dimethyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-3H-inden-5-yl acetate(1)，10β-羟基-艾里莫芬-7(11)-烯-12，8α-内酯(2)，β-谷甾醇(3)和β-胡萝卜苷(4)。其中化合物1为新的降二碳艾里莫芬烷型倍半萜。
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1 材料
BT224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司，北京)；RE52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂，上海)；KQ5200E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，江苏)；SHB-B95型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司，河南)；X-6显微熔点仪(北京泰克仪器有限公司，北京)；Agilent-1100-LC/MSD-Trap(美国安捷伦科技有限公司)；Bruker APEX质谱仪(瑞士布鲁克公司)；Bruker-VERTEX 70 FT-IR红外光谱仪；Bruker AV 600超导核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司)。薄层色谱硅胶GF254与柱色谱硅胶(200～300目)(青岛海洋化工有限公司)；Sephadex LH-20(Pharmacia)。其余试剂均为国产分析纯。狭苞橐吾于2011年8月采自河北省小五台山。
2 提取与分离
狭苞橐吾药材1.6 kg，75%乙醇提取3次，每次浸泡1周。提取液回收乙醇，得浸膏82.5 g。所得浸膏用硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(15∶1～0∶1)洗脱。石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脱部分点板后合并，以石油醚-丙酮(10∶1) 洗脱，得到化合物3 (23.6 mg)。石油醚-乙酸乙酯(3∶1) 洗脱部分点板后合并，以氯仿-丙酮(5∶1) 洗脱，并经凝胶柱色谱纯化，得到化合物1 (1.5 mg)和2 (3.2 mg)。石油醚-乙酸乙酯(1∶1) 洗脱部分点板后合并，以氯仿-甲醇(5∶1) 洗脱，得到化合物4 (13.2 mg)。
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3 结构鉴定
化合物1为白色油状，硫酸显色剂显红色。[α]20D+29.5(c 0.14，MeOH)。IR谱提示该化合物含有羟基(3 433 cm-1，3 421 cm-1)、酯羰基(1 739 cm-1)、α，β-不饱和酮羰基(1 660 cm-1)。HR-ESI-MS m/z 283.153 7 [M+H]+(计算值为283.154 5)，分子式为C15H22O5，不饱和度为5。1H-NMR显示化合物有4个甲基信号：δH 0.94(3H，d，J=7.2 Hz，H-12)，1.11(3H，s，H-13)，2.09(3H，s，H-2′)，2.35(3H，s，H-11)；1个三取代双键质子信号：δH6.99(1H，br s，H-8)；2个连氧质子信号：δH 3.90(1H，dd，J=12.6，4.2 Hz，H-1)，4.97(1H，m，H-3)。13C-NMR给出15个碳原子信号峰，包括4个甲基信号峰：δC 12.8(C-12)，14.1(C-13)，19.6(C-2′)，25.2(C-11)；1个三取代双键信号：δC 147.3(C-7)，142.7(C-8)；2个连氧碳质子信号：δC 66.9(C-1)，74.1(C-3)。以上信号推测该化合物为艾里莫芬烷型倍半萜化合物，并结合HSQC谱确定该化合物存在乙酰基信号、三取代双键信号。1H-1H COSY谱显示H-1与H-2的2个H(δH 1.48，2.08)有相关；H-3除了与H-2的2个H相关之外，还和H-4(δH 1.47)有相关，提示该化合物连氧部位是1位和3位。HMBC谱显示H-3与C-2(δC 35.0)，C-1′(δC 170.9)，C-4(δC 40.0)，C-5(δC 49.1)有远程相关，证实该化合物在1位连接羟基，3位连接乙酰基。以上化合物波谱数据与文献[4]中报道的化合物(3aR，4R，5S，7aS)-2-acetyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-7a-hydroxy-1H-inden-5-yl acetate数据相似，为一个降二碳艾里莫芬烷型倍半萜化合物，所不同的是，化合物1在1位连有羟基，并且双键位置在7位和8位之间，而不是文献中报导的在6位和7位之间(图1)。HMBC谱也证实了上述推断：H-1与C-8和C-9(δC 87.8) 有远程相关；H-6(δH 2.31，2.45) 与C-4，5，7，8有远程相关。艾里莫芬烷型倍半萜化合物12-Me与13-Me均在一侧，为β构型，H-1的偶合常数(J=12.6，4.2 Hz) 表明H-1为β构型[5]。13-Me(δH 1.11) 和处在高场的12-Me(δH 0.94) 表明9-OH和13-Me为同一方向，为β构型[6]。结合NOE差谱：照射H-3，发现H-4有增益，而H-1没有增益，表明H-3与H-4在一侧，H-1在另一侧，从而确定3位上连接的乙酰基为β构型，而1位上连接的羟基为α构型。至此，化合物1的相对构型确定，是新的降二碳艾里莫芬烷型倍半萜化合物，命名为(3aR，4R，5S，7S，7aS)-2-acetyl-7，7a-dihydroxy-3a，4-dimethyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-3H-inden-5-yl acetate。, http://www.100md.com(李树立 刘玉衡 郝秋娟 张香美 贾月梅 李娜)
[关键词]橐吾属；狭苞橐吾；艾里莫芬烷型倍半萜；甾醇
狭苞橐吾Ligularia intermedia Nakai 为菊科橐吾属植物，产于云南西北和东北部、四川、贵州、湖北、湖南、河南、甘肃、陕西、华北及东北等地[1]。民间用于润肺化痰、止咳平喘[2]。橐吾属植物含有三萜类、倍半萜类、单萜类、苯并呋喃类、黄酮类、生物碱类等化学成分，在抗肿瘤、消炎、镇咳等方面发挥着重要作用[3]。为深入研究和开发天然药物资源，本实验对狭苞橐吾进行了化学成分研究。从狭苞橐吾的地上部分中分离得到4个化合物，利用核磁共振等现代波谱数据并结合文献对比，将化合物确定为(3aR，4R，5S，7S，7aS)-2-acetyl-7，7a-dihydroxy-3a，4-dimethyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-3H-inden-5-yl acetate(1)，10β-羟基-艾里莫芬-7(11)-烯-12，8α-内酯(2)，β-谷甾醇(3)和β-胡萝卜苷(4)。其中化合物1为新的降二碳艾里莫芬烷型倍半萜。
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1 材料
BT224S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司，北京)；RE52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂，上海)；KQ5200E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，江苏)；SHB-B95型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司，河南)；X-6显微熔点仪(北京泰克仪器有限公司，北京)；Agilent-1100-LC/MSD-Trap(美国安捷伦科技有限公司)；Bruker APEX质谱仪(瑞士布鲁克公司)；Bruker-VERTEX 70 FT-IR红外光谱仪；Bruker AV 600超导核磁共振波谱仪(瑞士布鲁克公司)。薄层色谱硅胶GF254与柱色谱硅胶(200～300目)(青岛海洋化工有限公司)；Sephadex LH-20(Pharmacia)。其余试剂均为国产分析纯。狭苞橐吾于2011年8月采自河北省小五台山。
2 提取与分离
狭苞橐吾药材1.6 kg，75%乙醇提取3次，每次浸泡1周。提取液回收乙醇，得浸膏82.5 g。所得浸膏用硅胶柱色谱分离，以石油醚-乙酸乙酯(15∶1～0∶1)洗脱。石油醚-乙酸乙酯(8∶1)洗脱部分点板后合并，以石油醚-丙酮(10∶1) 洗脱，得到化合物3 (23.6 mg)。石油醚-乙酸乙酯(3∶1) 洗脱部分点板后合并，以氯仿-丙酮(5∶1) 洗脱，并经凝胶柱色谱纯化，得到化合物1 (1.5 mg)和2 (3.2 mg)。石油醚-乙酸乙酯(1∶1) 洗脱部分点板后合并，以氯仿-甲醇(5∶1) 洗脱，得到化合物4 (13.2 mg)。
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3 结构鉴定
化合物1为白色油状，硫酸显色剂显红色。[α]20D+29.5(c 0.14，MeOH)。IR谱提示该化合物含有羟基(3 433 cm-1，3 421 cm-1)、酯羰基(1 739 cm-1)、α，β-不饱和酮羰基(1 660 cm-1)。HR-ESI-MS m/z 283.153 7 [M+H]+(计算值为283.154 5)，分子式为C15H22O5，不饱和度为5。1H-NMR显示化合物有4个甲基信号：δH 0.94(3H，d，J=7.2 Hz，H-12)，1.11(3H，s，H-13)，2.09(3H，s，H-2′)，2.35(3H，s，H-11)；1个三取代双键质子信号：δH6.99(1H，br s，H-8)；2个连氧质子信号：δH 3.90(1H，dd，J=12.6，4.2 Hz，H-1)，4.97(1H，m，H-3)。13C-NMR给出15个碳原子信号峰，包括4个甲基信号峰：δC 12.8(C-12)，14.1(C-13)，19.6(C-2′)，25.2(C-11)；1个三取代双键信号：δC 147.3(C-7)，142.7(C-8)；2个连氧碳质子信号：δC 66.9(C-1)，74.1(C-3)。以上信号推测该化合物为艾里莫芬烷型倍半萜化合物，并结合HSQC谱确定该化合物存在乙酰基信号、三取代双键信号。1H-1H COSY谱显示H-1与H-2的2个H(δH 1.48，2.08)有相关；H-3除了与H-2的2个H相关之外，还和H-4(δH 1.47)有相关，提示该化合物连氧部位是1位和3位。HMBC谱显示H-3与C-2(δC 35.0)，C-1′(δC 170.9)，C-4(δC 40.0)，C-5(δC 49.1)有远程相关，证实该化合物在1位连接羟基，3位连接乙酰基。以上化合物波谱数据与文献[4]中报道的化合物(3aR，4R，5S，7aS)-2-acetyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-7a-hydroxy-1H-inden-5-yl acetate数据相似，为一个降二碳艾里莫芬烷型倍半萜化合物，所不同的是，化合物1在1位连有羟基，并且双键位置在7位和8位之间，而不是文献中报导的在6位和7位之间(图1)。HMBC谱也证实了上述推断：H-1与C-8和C-9(δC 87.8) 有远程相关；H-6(δH 2.31，2.45) 与C-4，5，7，8有远程相关。艾里莫芬烷型倍半萜化合物12-Me与13-Me均在一侧，为β构型，H-1的偶合常数(J=12.6，4.2 Hz) 表明H-1为β构型[5]。13-Me(δH 1.11) 和处在高场的12-Me(δH 0.94) 表明9-OH和13-Me为同一方向，为β构型[6]。结合NOE差谱：照射H-3，发现H-4有增益，而H-1没有增益，表明H-3与H-4在一侧，H-1在另一侧，从而确定3位上连接的乙酰基为β构型，而1位上连接的羟基为α构型。至此，化合物1的相对构型确定，是新的降二碳艾里莫芬烷型倍半萜化合物，命名为(3aR，4R，5S，7S，7aS)-2-acetyl-7，7a-dihydroxy-3a，4-dimethyl-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-3H-inden-5-yl acetate。, http://www.100md.com(李树立 刘玉衡 郝秋娟 张香美 贾月梅 李娜)