UPLC—MS/MS同时测定大承气汤大鼠血浆中9种活性成分的含量(2)
2.4 给药与样品采集 健康SD大鼠6只,雌雄各半,实验前12 h禁食不禁水,灌胃2.3项下大承气汤药液,连续14 d,在末次给药24 h后,大鼠眼眶取血,分离血清,置肝素化离心管中,立即离心分取血浆,于-40 ℃冰冻保存。2.5 血浆样品处理 取大鼠肝素抗凝血浆200 μL至PE管,加入100 μL的内标和氢氧化钠溶液(0.1 mol·L-1),再加入200 μL的盐酸溶液(0.1 mol·L-1)中和氢氧化钠及酸化样品,再加入1.5 mL的乙酸乙酯,涡旋混合提取7 min,3 000 r·min-1、离心7 min,将有机层转移至另一PE管,再加入1 mL的乙酸乙酯与水层涡旋混合提取7 min,3 000 r·min-1、离心7 min,合并2次乙酸乙酯,合并液用N2在50 ℃下吹干,残渣用300 μL进口甲醇溶解,再涡旋,15 000 r·min-1、离心5 min,取上清液,进行UPLC-MS/MS分析。
2.6 液相色谱-质谱分析条件 液相色谱条件:流动相A相为甲醇 ......
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