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编号:13124821
黄连与乌头对lewis肺癌细胞分化的作用比较(2)
http://www.100md.com 2014年7月15日 《中国中药杂志》 2014年第14期
     2.2细胞增殖检测 将对数生长期的LLC细胞以5 ×104·mL-1接种于96 孔板,每孔100 μL,每组设6个平行孔。细胞于含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中5% CO2 37 ℃培养24 h后,添加含不同浓度含药血清(0,1/5,1/10,1/20,1/40)的同一培养基每孔100 μL,继续培养48 h。吸弃培养基,每孔加含MTT 0.5 g·L-1的PBS (pH 6.8) 100 μL,培养4 h后,弃上清液,每孔加入二甲基亚砜100 μL,振摇5 min,用酶标仪570 nm测定各孔吸光度(A) 。细胞增殖率= A实验组/ A对照组×100%。

    2.3细胞分化检测 取对数生长期的LLC细胞,以2×105·mL-1接种于培养瓶,每瓶3 mL,细胞于含10% 胎牛血清的RPMI1640培养基中5% CO2 37 ℃培养24 h后,添加含不同浓度含药血清(0,1/5,1/10,1/20)的同一培养基每瓶3 mL,继续培养48 h,消化细胞,加抗粘蛋白MUC1多克隆抗体孵育1 h,吸取多于抗体后加入FITC标记IgG孵育30 min,洗去多于抗体后流式细胞仪检测细胞阳性率 ......
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