穿心莲内酯衍生物炎琥宁对大鼠体内白念珠菌生物膜的影响(2)
2.3 体内生物膜CFU计数实验 从体内将导管片取出,用PBS冲洗2次后,振荡仪涡旋30 s,超声仪4万Hz超声10 min,使生物膜从导管片上脱离下来。将菌悬液按照1∶10连续稀释后,取50 μL洗液均匀涂抹于沙氏琼脂平皿,37 ℃培养48 h后计数CFU。实验重复3次,取平均值。2.4 XTT法检测体内生物膜的活性 以0.5 g·L-1林格液配制XTT并用0.22 μm的过滤器过滤除菌,临用加入维生素K3(menadione,用丙酮稀释至终浓度10 mmol·L-1)。将体内导管片取出后,用PBS冲洗2次后,振荡仪涡旋30 s,超声仪4万Hz超声10 min,取200 μL PBS洗涤液加入96孔板,加XTT-Vk3溶液100 μL,37 ℃避光培养2 h。酶标仪492 nm检测吸光度A。实验重复3次,取平均值。
2.5 扫描电镜检查体内生物膜 将待检测的导管片标本取出,PBS缓冲液洗1次 ......
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