丹参毛状根的诱导及培养条件的优化(2)
2.1.4 不同发根农杆菌诱导的丹参毛状根丹酚酸含量测定 经PCR鉴定，发根农杆菌A4，LBA9402，15834分别获得了5，10，6株丹参毛状根阳性株系。将阳性株系均以每100 mL培养基1 g(鲜重)接种，MSOH液体培养基培养21 d后收取材料。分别收集了第4，5，6，9，10共5代材料于-80 ℃保存，冷冻干燥机冻干，置于电子干燥器中储存备用。对照品溶液的制备：精密称取丹酚酸B对照品2.4 mg，加70%甲醇和1%甲酸制成1.2 g·L-1的丹酚酸B(SAB)对照品溶液；精密称取迷迭香酸(RA)对照品1 mg，加70%甲醇和1%甲酸制成0.5 g·L-1的迷迭香酸对照品溶液。
供试品溶液的制备：样品研磨成粉，将由同种发根农杆菌诱导的相同代数的丹参毛状根粉末等量混匀。精密称取混匀粉末50 mg，精密加入70%甲醇和1%甲酸10 mL，超声40 min。每个样品重复3次。
色谱条件：CNW C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，检测波长280 nm，柱温25 ℃，流速1.0 mL·min-1 ......
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