波棱素脂质体冻干粉针的制备及初步安全性和药效学研究(2)
2.5 全血凝血时间取波棱素脂质体冻干粉针复水液10 μL,以等量生理盐水作为对照,加入24孔细胞培养板中。另取枸橼酸葡萄糖抗凝家兔血适量,按体积比10∶1加入0.1 mol·L-1CaCl2溶液进行活化,混匀,立即各取100 μL加入上述含有样品的培养板中,分别于5,15,25,35,45,55 min时间点加入3 mL 37 ℃预热的蒸馏水于对应的样品孔中。5 min后取出适量样品液离心去除不溶物,于542 nm下测定各样品光密度值。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标绘制全血凝固时间曲线,见图1,HPT脂质体冻干粉针复水液样品的全血动态凝血曲线与对照组相似,可知HPT脂质体对全血凝固时间无显著影响。
2.6 血管刺激试验
取雄性家兔1只,每日右耳耳缘静脉注射HPT脂质体复水液20.0 mg·kg-1,左耳耳缘静脉注射生理盐水注射液,作为空白对照组,每天1次,连续滴注4 d ......
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