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编号:12647336
基于“组分结构”理论的8种墨旱莲乙酸乙酯提取物对NHBE细胞保护作用的比较(2)
http://www.100md.com 2014年8月15日 中国中药杂志 2014年第16期
     分别称取不同批次墨旱莲药材8份,每份100 g,加7倍量80%乙醇回流提取3次,合并滤液,浓缩。浓缩液经石油醚、乙酸乙酯依次萃取,将各乙酸乙酯部位药液浓缩至干浸膏,得到8种墨旱莲乙酸乙酯提取物(EAEEP),记作EAEEPⅠ~Ⅷ。

    2.2 8种EAEEP对香烟诱导NHBE细胞保护作用的测定

    2.2.1 CSE的制备 参考Misbah Baqir等[7]的方法,燃烧香烟1根(含焦油11 mg,尼古丁1.1 mg),形成的烟雾吸收于10 mL无血清空白培养基中,制备100%的CSE溶液,经0.22 μm无菌微孔滤膜过滤后给药。

    2.2.2 EAEEP对NHBE细胞活性测定 NHBE细胞于37 ℃,5%CO2条件下培养,隔天换液,2 d传代。取生长状态良好的NHBE细胞,调整细胞密度约为8×103个/mL。取96孔细胞培养板,每孔加入100 μL细胞悬液,培养24 h后,加入10 μL CSE和EAEEP ......
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