逆转录成cDNA：检测A260/A280，调节RNA浓度，使菌体模板量一致。依据逆转录试剂盒说明书，将提取的总RNA反转录成cDNA。

    实时荧光定量PCR反应：按SYBR Green Realtime PCR Master Mix试剂盒配制反应液如下：2×SYBR Green Master Mix 12.5 μL，上游引物(10 μmol·L^-1)1 μL，下游引物1 μL，cDNA 0.5 μL，蒸馏水，共25 μL。反应条件设置为：预变性 95 ℃ 3 min，变性95 ℃ 15 s，退火55 ℃ 15 s，延伸72 ℃ 45 s，共40 循环。采用ABI7000荧光定量PCR仪进行扩增反应。实验平行重复3次。

    实时荧光定量PCR分析：以ACT1为内参，测定每个样品目的基因的Ct值。结果以软件Graphpad Prism 5.0进行分析，利用2-ΔΔCt法计算各基因表达水平，用倍数变化表达。

    2.7 统计学处理 实验数据采用SPSS 17.0作统计学处理，计量资料以±s表示，组间差异比较采用ANOVA检验 ......